Effects of Crlaa and TCM-199 media on invitro embryonic development until blastocyst stage in cattle

Abstract

Sığır oositlerinin, in-vitro maturasyonu ve fertilizasyonu (IVM / IVF) araştırma ya da transfer için çok sayıda embriyonun üretilmesi açısından önemli tekniklerdir. Bu metotların kullanılmasıyla, gelişimlerinin farklı dönemlerinde olan embriyolar elde edilebilir. Ancak, blastosist verimi şu an mevcut olan tekniklerle hala düşük düzeydedir. Çünkü, bu tekniklerin verimliliği henüz yeterli değildir, kültür için gelişme şartları iyi bir şekilde anlaşılamamıştır ve sığır embriyolarının in-vitro şartlarda, blastosist aşamasına kadar gelişmelerini sağlayacak gereksinimleri hakkında daha çok bilgi için birçok çalışma sürdürülmektedir. Bu çalışmanın amacı, sığır embriyoları için en yaygın biçimde kullanılan kültür vasatlarından, CRIaa ve TCM-199 vasatlarının IVM / IVF yoluyla elde edilmiş sığır embriyolarının, I-hücre aşamasından blastosist aşamasına kadarki gelişimleri üzerindeki etkilerinin karşılaştırılmasıdır. CRIaa serum içermeyen basit bir vasattır. Fakat 4. günde % 10 oranında fötal buzağı serumu (FCS) vasat içerisine eklenmektedir. Fertilizasyondan sonra, embriyolar 1. günden 9. güne kadar kontrol edildiler ve her gelişme dönemindeki yüzdelik oranları kaydedildi. CRlaa vasatı ile TCM-199 vasatı karşılaştırıldığında; sonuç, embriyoların CRIaa vasatı içerisinde daha yüksek bir oranda morula ve blastosiste gelişme yeteneğine sahip olduklarını g6stermiştir. Buna rağmen, morula ve blastosiste gelişme oranı (%25) hala düşüktür. Verimin böylesine düşük olmasının nedenlerinin açıklanması ve sığır embriyolarının gelişimi için optimum kültür vasatının bulunması için daha çok araştırma yapılması gerekmektedir.In-vitro maturation and fertilization (IVM / IVF) of bovine oocytes are important techniques used for mass-production of embryos either for research or transfer. Using these methods, embryos at different developmental stage can be obtained. However, the blastocyst yield is still low while using the current available techniques because the efficiency of these techniques are not yet optimal. Developmental conditions for culture have not been well established, anda lot of research is under way to learn more about the requirements of bovine embryos to develop to the blastocyst stage in-vitro. The objective of this study was to compare development of IVM / IVF embryos from the 1-cell stage to the blastocyst stage by using two different media (CRIaa and TCM-199), the most commonly used embryo culture media for bovine embryos. CR/aa is a simple serum-free me di um, while 10 %fetal calf serum (FCS) is added to CRIaa on day 4. Embryos were examined once a day from day 1 up to day 9 after fertilization, and the percentage of each developmental stage was recorded. The results showed that embryos have a greater ability to develop to the morula and blastocyst stage when CRiaa-medium is used and compared to TCM-199. However, the overall percentage of development to morula and blastocyst was still low (25%). More research is nedeed to explain why the yield is so low, and to find the optimal culture medium for development of bovine embryos.